Descriere
The E.Z.N.A.® FastFilter Plasmid DNA Midi Kit combină comoditatea coloanelor de centrifugare cu viteza filtrelor de seringă pentru a facilita prepararea la scară largă a plasmidelor. Sistemul utilizează seringi cu filtru de clarificare a lizatelor în loc de centrifugare pentru a clarifica rapid lizatele bacteriene după liza alcalină și urmează o procedură simplă „legare-spălare-eliberare” pentru a livra ADN plasmidic de înaltă calitate. Randamentele variază în funcție de numărul de copii ale plasmidelor, tulpina de E. coli și condițiile de creștere. 15-50 mL de culturi bacteriene în mediu LB produc de obicei până la 200 µg de ADN plasmidic cu număr mare de copii. Până la 100 mL de cultură pot fi procesate atunci când se lucrează cu plasmide cu număr mic de copii. Sistemul folosește tehnologia de centrifugare sau vid pentru purificarea plasmidelor și elimină coloanele de curgere gravitațională care necesită precipitare cu alcool și sunt consumatoare de timp. ADN-ul plasmidic purificat este potrivit pentru secvențierea automată fluorescentă a ADN-ului (citirile tipice depășesc 800 bp), digestia cu enzime de restricție, ligare, PCR, transcripție in vitro, transformare și alte aplicații.