Descriere
Repere ale produsului
- Simplu – protocol simplificat pentru validarea directă a extracției ADN și determinarea inhibiției testului qPCR
- Sensibil – testul de control identifică chiar și efectele minore asupra extracției ADN și inhibiției amplificării
- Optimizat – ADN-ul de control are o secvență fără omologie cunoscută cu vreun organism, evitând astfel detectarea ADN-ului din eșantion
- Specific – test bazat pe probe, conceput special pentru testele PCR în timp real
- Flexibil – ideal pentru utilizare cu o gamă largă de tipuri de eșantioane, inclusiv eșantioane bogate în inhibitori, cum ar fi sângele, urina și sputa
O practică comună în qPCR este adăugarea unei cantități cunoscute de ADN de control introdus după extracția ADN, aceasta monitorizând inhibiția PCR, dar fără valoare ca și control al extracției. Situația ideală este ca eșantionul de test și controlul intern să fie supuse aceluiași proces înainte de qPCR. Meridian a dezvoltat Controlul de Extracție qPCR, care imită mai îndeaproape eșantionul de test, comparativ cu controalele introduse. Materialul genetic din eșantionul de test și Controlul de Extracție qPCR este extras simultan prin metode comune de extracție, controlul extracției fiind la fel de sensibil la inhibiție și eșecul extracției ca și eșantionul de test.
Celulele de Control de Extracție qPCR sunt de o concentrație cunoscută, conținând secvența ADN-ului de Control Intern. Această secvență nu are omologie cunoscută cu vreun organism și, important, are o interferență minimă cu detectarea ADN-ului din eșantion. Celulele de Control de Extracție qPCR sunt introduse în tamponul de liza cu eșantionul țintă, înainte de extracția ADN. Amestecul de Control, care include primeri și probă, este apoi adăugat la amestecul de reacție înainte de amplificare. Semnalul derivat din ADN-ul de Control Intern confirmă succesul etapei de extracție. Controlul de Extracție qPCR monitorizează, de asemenea, co-purificarea inhibitorilor PCR care pot cauza modele de amplificare părtinitoare sau false.
Aplicații
- Detectarea agenților patogeni
- Evaluarea riscului de cancer
- Analiza expresiei genice
- Analiza variației numărului de copii (CNV)
- Genotipare
- Încărcare virală
