Descriere
Repere ale produsului
- Simplu – protocol simplificat pentru validarea directă a extracției de ARN și determinarea inhibiției testului RT-qPCR
- Sensibil – testul de control identifică chiar și efectele minore asupra extracției de ARN și inhibiției amplificării
- Optimizat – ARN-ul de control are o secvență fără omologie cunoscută cu vreun organism, evitând astfel detectarea ARN-ului din probă
- Specific – test bazat pe sondă, conceput special pentru secvența de control REC
- Flexibil – ideal pentru utilizarea cu o gamă largă de tipuri de probe, inclusiv probe bogate în inhibitori, cum ar fi sângele, urina și sputa
O practică comună în qPCR este adăugarea unei cantități cunoscute de ARN de control adăugat după extracția ARN-ului, aceasta monitorizează inhibiția PCR, dar nu are valoare ca un control al extracției. Situația ideală este ca proba de test și controlul intern să fie supuse aceleiași procesări înainte de qPCR. Meridian a dezvoltat un Control de Extracție RT-qPCR, care imită mai îndeaproape proba de test, comparativ cu controalele adăugate. Materialul genetic din proba de test și Controlul de Extracție RT-qPCR este extras simultan prin metode comune de extracție, controlul extracției fiind la fel de sensibil la inhibiție și eșecul extracției ca și proba de test.
Celulele de Control de Extracție Artificial RT-qPCR sunt de o concentrație cunoscută, conținând secvența de ARN de Control Intern. Această secvență nu are omologie cunoscută cu vreun organism și, important, are o interferență minimă cu detectarea ARN-ului din probă. Celulele de Control de Extracție RT-qPCR sunt adăugate în tamponul de liză împreună cu proba țintă, înainte de extracția ARN-ului. Amestecul de Control, care include primeri și sondă, este apoi adăugat în amestecul de reacție înainte de amplificare. Semnalul derivat din ARN-ul de Control Intern confirmă succesul etapei de extracție. Controlul de Extracție RT-qPCR monitorizează, de asemenea, co-purificarea inhibitorilor PCR care pot cauza modele de amplificare părtinitoare sau false.
Aplicații
- Detectarea agenților patogeni
- Evaluarea riscului de cancer
- Analiza expresiei genice
- Eficacitatea terapiei medicamentoase
- Validarea biomarkerilor
- Analiza variației numărului de copii (CNV)
- Genotipare
- Încărcarea virală
