Kit Mini ARN ISOLATE II

Purificare extrem de eficientă a ARN-ului total prin combinarea stringenței lizei cu tiocianat de guanidiniu cu viteza și puritatea purificării pe coloană cu membrană de silice.

Category:Kituri de extracție ARN Brand: Bioline

Descriere

Nr. Cat.	Dimensiune
BIO-52071	10 Preps
BIO-52072	50 Preps
BIO-52073	250 Preps

Repere ale produsului

Rapid – extracție simplă a ARN-ului total de înaltă puritate din șase probe, ideală pentru utilizare în toate aplicațiile, în doar 30 de minute
Performanță ridicată – recuperare constantă de ARN de înaltă calitate dintr-o varietate largă de celule și țesuturi animale, bacteriene și vegetale și probe fără celule
Eficient – condiții de liza optimizate și matrice de coloană pentru recuperarea a până la 70 mg de ARN de înaltă puritate din fiecare probă
Convenabil – include toate componentele necesare, inclusiv filtre (tocătoare) și DNază I
Sigur – fără extracție periculoasă cu fenol/cloroform, centrifugare CsCl, LiCl sau precipitare cu alcool

Kitul ISOLATE II RNA Mini oferă o metodă simplă și eficientă bazată pe coloană pentru izolarea ARN-ului total dintr-o varietate largă de materiale de pornire, fără a fi nevoie de reactivi periculoși precum fenolul.

Prin combinarea stringenței lizei cu guanidiniu-tiocianat cu viteza și ușurința de utilizare a purificării cu membrană de silice, kitul ISOLATE II RNA Mini oferă o metodă rapidă pentru purificarea ARN-ului total de înaltă calitate din celule și țesuturi animale și vegetale, precum și din celule cultivate, celule bacteriene, drojdii, fluide biologice și probe fără celule.

Probele biologice care sunt uneori dificil de procesat, adică țesut de șoarece (ficat, creier), diverse linii celulare tumorale, Streptococcus și Actinobacillus pleuropneumoniae, vor oferi ARN de înaltă calitate cu kitul ISOLATE II RNA Mini.

Manualul online al produsului conține protocoale pentru purificarea ARN-ului total din celule cultivate, țesuturi, drojdii, bacterii, lichide biologice, țesuturi încorporate în parafină și probe tratate cu RNAlater^®. Există, de asemenea, un protocol pentru un tratament convenabil cu DNază pe coloană, folosind DNază I fără RNază, care este furnizată cu kitul, pentru aplicații sensibile la cantități foarte mici de ADN.

Kitul ISOLATE II RNA Mini a fost conceput pentru a oferi performanțe optime în RT-qPCR în combinație cu fie Kitul de Sinteză SensiFAST cDNA și Kiturile SensiFAST Real-Time PCR, fie Kiturile SensiFAST One-Step Real-Time RT-PCR. În plus, kitul ISOLATE II RNA Mini poate fi utilizat pentru purificarea probelor pentru amplificarea PCR și RT-PCR folosind Kitul de Sinteză Tetro cDNA și orice enzimă din portofoliul Meridian PCR, inclusiv MyTaq DNA Polymerase.

Aplicații

RT-qPCR
RT-PCR la punct final
Blotting Northern, dot și slot
Analiza array
Selecția ARN-ului Poly A+
RNA-Seq

Specificatii

Componente

Reactiv	10 Preps	50 Preps	250 Preps
Filtre ISOLATE II	10	50	250
Coloane Mini RNA ISOLATE II & Tuburi de Colectare	10	50	250
Tuburi de Colectare (2 mL)	30	150	750
Tuburi de Colectare (1.5 mL)	10	50	250
Buffer de Liza RLY	10 mL	25 mL	125 mL
Buffer de Spălare RW1	15 mL	15 mL	80 mL
Buffer de Spălare RW2	6 mL	12 mL	3 x 25 mL
Buffer de Desalinizare Membrană MEM	10 mL	25 mL	125 mL
Buffer de Reacție pentru DNase I RDN	7 mL	7 mL	30 mL
DNase, fără RNase (liofilizat)	1 Flacon	1 Flacon

Resurse

Documente

ISOLATE II RNA Mini Kit - Manual de Produs

ISOLATE II RNA Mini Kit - MSDS

ISOLATE II RNA Mini Kit - Protocol

Ultimele Certificate de Analiză (COAs)

BIO-52073_IS510-B126530

Recenzii

"Am folosit kitul ISOLATE II RNA mini pentru a izola ARN dintr-o gamă de murine ... "

Cavan Bennett, Institutul de Cercetare Medicală Walter și Eliza Hall, Melbourne, Australia

"Am folosit produsele Meridian (în special Kitul Isolate II RNA mini, ... "

Kuan Won, Institutul de Cercetare Mater, Brisbane, Australia

"Am folosit recent kitul ISOLATE II RNA Mini. Am avut câteva celule cultivate care ... "

Sharon Pok, Școala Medicală a Universității Naționale Australiene, Garran, Australia

"Am utilizat kitul ISOLATE II RNA Mini de la Meridian și am constatat ... "

Aparna Jayachandran, GMRF-UQ, Brisbane, Australia

Întrebări Frecvente

Pot folosi coloane sau soluții dintr-un kit în altul?

Coloanele furnizate cu kiturile ISOLATE II pot părea similare, dar fiecare tip a fost optimizat să funcționeze în cadrul sistemului de buffer furnizat cu kitul corespunzător. Schimbarea coloanelor (sau a bufferelor) între kituri poate duce la nerecuperarea acidului nucleic sau, cel puțin, la o purificare sever afectată.

Este posibilă întreruperea protocoalelor de extracție a ADN-ului sau ARN-ului?

Întreruperea procesului de extracție a ADN/ARN este posibilă doar după liza probei. Este posibil să omogenizați și să lizați probele și să le depozitați în congelator până la utilizare pentru extracția ARN-ului. Curățarea ARN-ului cu o coloană nu poate fi întreruptă și recomandăm evitarea întârzierilor în timpul procesului de purificare pe coloană. Dacă o întârziere este inevitabilă, coloanele ar trebui depozitate pe gheață.

Probele noastre extrase arată o citire ridicată la 230nm, rezultând un raport 260/230 slab. Care este motivul și ce înseamnă în ceea ce privește calitatea ARN-ului?

O creștere a valorilor A₂₃₀ poate fi cauzată de diferite substanțe, cum ar fi carbohidrații, peptidele și fenolul. Un raport A₂₃₀/A₂₆₀ slab în probele de ARN este de obicei datorat unei contaminări cu tiocianat de guanidiniu, care este prezent în mai mulți reactivi folosiți pentru extracția ARN-ului, de exemplu în bufferul de liza. Spre deosebire de un raport A₂₈₀/A₂₆₀ slab, acesta nu reflectă automat o calitate slabă a ARN-ului. În prezent, nu există un consens cu privire la o limită inferioară a acestui raport și, în general, un transfer de tiocianat de guanidiniu nu afectează fiabilitatea aplicațiilor ulterioare. Totuși, un pas suplimentar de spălare cu RW2 ar fi util pentru a evita această problemă. De asemenea, ar fi util să pipetați fracția de curgere din tubul de colectare, în loc să o turnați.

Care este kitul recomandat pentru procesarea probelor de sol sau a bacteriilor greu de lizate?

Este posibil să folosiți kiturile ISOLATE II pentru ADN și ARN de plante. Liza optimizată a acestor kituri poate fi, de asemenea, utilă pentru procesarea bacteriilor și fungilor greu de lizate în probele de sol.

Ce trebuie să iau în considerare pentru curățarea fragmentelor mari?

Pentru recuperarea optimă a fragmentelor mari de ARN/ADN este necesar să optimizați pasul de elutie. Pentru a crește rata de recuperare ar fi util să folosiți un volum mai mare pentru elutie, să incubați coloana cu bufferul de elutie înainte de centrifugare și să folosiți pași de elutie repetate. Pentru a evita diluarea excesivă ar fi util să reaplicați fracția eluată din nou.

Care este kitul sau protocolul recomandat pentru extracția ARN-ului din țesuturi cu conținut ridicat de lipide, cum ar fi țesutul adipos sau cerebral?

Există mai multe posibilități. Dacă folosiți kitul nostru de extracție pe bază de coloane, cum ar fi kitul ISOLATE II RNA Mini, ar fi necesar să reduceți cantitatea de probă a acestor probe sau să creșteți cantitatea de buffer de liza RLY pentru a preveni înfundarea coloanelor. O altă posibilitate ar fi o pre-extracție cu TRIsure (BIO-38032) și să curățați faza apoasă care conține ARN-ul cu kiturile pe bază de coloane ISOLATE II RNA. Ar trebui să urmați protocolul TRIsure până la pasul de separare a fazelor. Apoi amestecați faza apoasă cu un volum de etanol și încărcați-o pe coloană. De acolo ar trebui să continuați cu protocolul obișnuit al kitului ISOLATE II RNA Mini.