Descriere
Repere ale produsului
- Simplu – protocol simplificat pentru validarea directă a extracției ADN și determinarea inhibiției testului qPCR
- Sensibil – testul de control identifică chiar și efectele mici asupra extracției ADN și inhibiției amplificării
- Optimizat – ADN-ul de control are o secvență fără omologie cunoscută cu vreun organism, evitând astfel detectarea ADN-ului din probă
- Specific – test bazat pe sondă, conceput special pentru testele PCR în timp real
- Flexibil – ideal pentru utilizarea cu o gamă largă de tipuri de probe, inclusiv probe bogate în inhibitori, cum ar fi probele de sânge, urină și spută
O practică comună în qPCR este adăugarea unei cantități cunoscute de ADN de control după extracția ADN-ului, aceasta monitorizează inhibiția PCR, dar nu are valoare ca și control al extracției. Situația ideală este ca proba de test și controlul intern să treacă prin același proces înainte de qPCR. Meridian a dezvoltat Controlul de Extracție qPCR, care imită mai îndeaproape proba de test, comparativ cu controalele de tip spike. Materialul genetic din proba de test și Controlul de Extracție qPCR este extras simultan prin metode comune de extracție, controlul extracției fiind la fel de sensibil la inhibiție și eșecul extracției ca și proba de test.
Celulele de Control de Extracție qPCR sunt de o concentrație cunoscută, conținând secvența ADN-ului de Control Intern. Această secvență nu are omologie cunoscută cu vreun organism și, important, are interferență minimă cu detectarea ADN-ului din probă. Celulele de Control de Extracție qPCR sunt adăugate în tamponul de liză împreună cu proba țintă, înainte de extracția ADN-ului. Mixul de Control, care include primeri și sondă, este apoi adăugat la mixul de reacție înainte de amplificare. Semnalul derivat din ADN-ul de Control Intern confirmă succesul etapei de extracție. Controlul de Extracție qPCR monitorizează, de asemenea, co-purificarea inhibitorilor PCR care pot cauza modele de amplificare părtinitoare sau false.
Aplicații
- Detectarea agenților patogeni
- Evaluarea riscului de cancer
- Analiza expresiei genice
- Analiza variației numărului de copii (CNV)
- Genotipare
- Încărcare virală
