Descriere
Reactivul RNA-Solv® este un sistem cu un singur reactiv pentru izolarea ARN total din celule și țesuturi. Reactivul, o soluție monofazică care constă din fenol și izotiocianat de guanidină, este o modificare a metodei de izolare a ARN-ului într-un singur pas, dezvoltată de Chomczynski și Sacchi (1). Proba este omogenizată și lizată în Reactivul RNA-Solv®, care menține integritatea ARN-ului în timp ce perturbă și denaturează RNazele endogene și alte componente celulare. Extracția lizatelor cu cloroform denaturează suplimentar proteinele și separă amestecul într-o fază organică și una apoasă. ARN-ul rămâne exclusiv în faza apoasă și este ulterior recuperat prin izopropanol.
Această metodă este potrivită pentru o gamă largă de materiale de pornire; până la 1 g de țesut sau 1 x 10^8 celule de origine umană, animală, vegetală sau bacteriană. Simplitatea metodei cu Reactivul RNA-Solv® permite procesarea simultană a unui număr mare de probe. Întreaga procedură poate fi completată într-o oră. ARN-ul total preparat poate fi utilizat pentru analiza Northern blot, hibridizare dot blot, selecție poli(A)+, traducere in vitro, test de protecție RNază și clonare moleculară. Pentru utilizarea în amplificare prin ciclare termică, se recomandă tratarea ARN-ului izolat cu DNază I fără RNază atunci când cei doi amplimeri se află într-un singur exon.
Doar pentru cercetare. Nu pentru utilizare în proceduri de diagnostic.
